7ألفا-هيدروكسي كوليسترول هو أوكسيستيرول يتم تصنيعه عن طريق أكسدة السلسلة الجانبية للكوليسترول. وهو مقدمة لحمض الصفراء. يستخدم 7ألفا-هيدروكسي كوليسترول-d7 كمعيار داخلي لقياس الكوليسترول وأوكسيستيرول بواسطة كروماتوغرافيا الغاز-مطياف الكتلة (GC/MS). يتم تكوين 7ألفا-هيدروكسي كوليسترول عن طريق أكسدة الكوليسترول بواسطة إنزيم 7ألفا-هيدروكسيلاز الكوليسترول/CYP7A1 في ميكروسومات كبد الفئران. تم العثور على 7ألفا-هيدروكسي كوليسترول في البلاعم المعزولة من الآفات العصيدية في الأرانب التي تغذت على نظام غذائي عالي الكوليسترول.