أوكسيداز الكوليسترول هو إنزيم فلافيني خاص بالبكتيريا يُنتج من سلالات الستربتوميسيز، بوزن جزيئي يبلغ 62 كيلو دالتون. يتمتع بدرجة حموضة ودرجة حرارة مثلى تبلغ 7 و37 درجة مئوية على التوالي، ويتكون من مجال لربط FAD ومجال لربط الستيرويد. يحفز هذا الإنزيم أكسدة وتماكب الستيرويدات التي تحتوي على مجموعة هيدروكسيل 3β ورابطة مزدوجة في الموضع 5-6 من نظام الحلقة الستيرويدية. ينتمي أوكسيداز الكوليسترول إلى عائلة كبيرة من الأكسيدوريدوكتازات الخاصة بالفلافين ويوجد في شكلين مختلفين: أحدهما يرتبط فيه العامل المساعد FAD تساهمياً بالبروتين والآخر يرتبط فيه العامل المساعد غير تساهمي بالبروتين.